從幾支毒株到千萬份疫苗　安全有效是不變的主題

　　盡管我國研究機(jī)構(gòu)已分離到甲型H1N1流感病毒，但是疫苗生產(chǎn)企業(yè)還是要等世衛(wèi)組織提供的生產(chǎn)疫苗用毒株。這是因?yàn)閺幕颊唧w內(nèi)直接分離出的病毒毒株即野毒株毒性強(qiáng)，而生產(chǎn)疫苗用毒株則是經(jīng)過特殊培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)室改造過的重配株，保留了病毒的抗原性和復(fù)制能力，并使其致病性喪失或降低到安全所允許的范圍之內(nèi)。

　　生產(chǎn)重配株對(duì)實(shí)驗(yàn)室的生物安全性要求很高，因此，全球疫苗生產(chǎn)企業(yè)每次都是通過世衛(wèi)組織拿到其認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)的疫苗用毒株，這些是生產(chǎn)疫苗的原始種子，因此也叫“毒種”。企業(yè)獲得的毒種一般量比較少，不足以批量生產(chǎn)疫苗，因此必須對(duì)其進(jìn)行稀釋、擴(kuò)增培養(yǎng)，制備病毒種子批后再生產(chǎn)疫苗。

　　趙鎧告訴記者，生產(chǎn)疫苗需要大量9—11日齡的雞胚。這些雞胚由專業(yè)的公司培養(yǎng)、提供。毒種稀釋后，種入選好的雞胚的尿囊腔中（相當(dāng)于人胚胎的羊水），隨后將雞胚放入密閉、無菌、恒溫的孵化箱中，使病毒快速繁殖。雞胚培養(yǎng)一定時(shí)間后，抽取尿囊腔里的液體，然后測定病毒血凝滴度，以確定培養(yǎng)的效果。然后將收獲的二代病毒再重復(fù)同樣的步驟進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，以獲得更多代毒種，為保證其抗原性，一般不超過五代，這樣一支毒種就變成了成千上萬支，被作為疫苗生產(chǎn)用種子批保留，整個(gè)過程需要7—8天。

　　之后就抽用種子批毒種進(jìn)行病毒培養(yǎng)，病毒大規(guī)模的培養(yǎng)所用的雞胚一次可達(dá)到幾萬枚，培養(yǎng)收獲過程和獲得種子批病毒過程一樣。

　　因?yàn)槭佬l(wèi)組織提供的是活毒株，盡管感染性很低，還是要對(duì)生產(chǎn)出來的病毒進(jìn)行滅活處理，去除病毒的致病力，以進(jìn)一步保證疫苗的安全。采用滅活劑處理一定時(shí)間，就獲得了病毒滅活液。病毒滅活液還要進(jìn)行純化，以保留病毒作為疫苗的有效成分抗原，去除病毒滅活液中的其他雜質(zhì)，如雞胚里面的蛋白、滅活用的化學(xué)試劑等，以避免這些雜質(zhì)對(duì)人體產(chǎn)生不良反應(yīng)。之后進(jìn)行配制，最后灌裝成疫苗成品。

　　疫苗生產(chǎn)出來后，企業(yè)還要對(duì)成品進(jìn)行抽樣檢查，以測定其有效性和安全性，然后送到中國藥品生物制品檢定所檢測，只有獲得批簽發(fā)合格證后才能投入使用。為了盡可能縮短時(shí)間，中國藥品生物制品檢定所已經(jīng)決定對(duì)甲型H1N1流感疫苗實(shí)行啟動(dòng)同步批簽發(fā)，即在企業(yè)測試的同時(shí)檢定所也進(jìn)行測試。

　　趙鎧說，疫苗研制過程中，安全有效、質(zhì)量可控是最關(guān)鍵、最重要的一點(diǎn)，所有的程序和步驟也都是圍繞著這個(gè)目標(biāo)。

　　病毒是一種比細(xì)菌還小、沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)、由蛋白質(zhì)和核酸組成的微生物。病毒直徑大小以納米計(jì)算。細(xì)菌是以二分裂方式增殖，1個(gè)變2個(gè)，2個(gè)變4個(gè)……；病毒則不一樣，是以核酸復(fù)制的方式增殖，如甲型H1N1流感病毒有8個(gè)基因片斷，在感染細(xì)胞后病毒會(huì)脫開釋放出基因片斷，復(fù)制后的基因片斷再重組成大量病毒并能隨機(jī)體細(xì)胞釋放出來。在病毒基因組裝過程中，如果順序發(fā)生改變則會(huì)導(dǎo)致病毒變異，正是這種增殖特性使得病毒容易變異。